摘要：目的：利用親和純化技術聯(lián)合質譜分析篩選鑒定與S100A8和S100A9相互作用的蛋白,為探討S100A8和S100A9在結腸炎相關性結腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用機制提供線索。方法：構建含有S100A8和S100A9 CDS區(qū)和Flag親和標簽的真核表達載體p3×Flag-CMV-S100A8和p3×Flag-CMV-S100A9,將其轉染至HEK293細胞中,48 h后收集蛋白。運用標簽分離純化S100A8和S100A9蛋白,液相質譜/質譜分析技術（liquid chromatography mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS）鑒定S100A8和S100A9的相互作用蛋白,通過生物信息學的方法（GO分析）歸納分析相互作用蛋白,免疫共沉淀實驗鑒定S100A8和S100A9的相互作用蛋白。結果：通過標簽純化聯(lián)合質譜分析成功鑒定出PKM,NPM1,e IF5A等14個與S100A8相互作用的蛋白,鑒定出14-3-3ε,PKM等6個與S100A9相互作用的蛋白。對所鑒定的相互作用蛋白進行生物信息學分析,發(fā)現(xiàn)與S100A8和S100A9相互作用的蛋白參與糖代謝、細胞黏附、正向調控NF-κB轉錄因子活性、抗凋亡等在內的生物信號通路,并利用免疫共沉淀證實PKM2與S100A8和S100A9發(fā)生相互作用,14-3-3ε與S100A9發(fā)生相互作用。結論：利用免疫共沉淀結合質譜技術篩選鑒定的S100A8和S100A9相互作用蛋白PKM2和14-3-3ε,可能為闡明S100A8和S100A9在結腸炎相關性結腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用機制提供重要線索。