MiR-199a-3p對大鼠肝細胞增殖的抑制作用
摘要：目的探討miR-199a-3p對體外培養(yǎng)SD大鼠BRL-3A增殖的影響.方法人工合成miR-199a-3p模擬物、miR-199a-3p阻遏物及其各自陰性對照載體,分別轉(zhuǎn)染BRL-3A肝細胞,轉(zhuǎn)染后12 h、24 h、48 h和72h,應(yīng)用定量PCR分析細胞中Cyclin D1和PCNA mRNA表達水平,免疫組化方法觀測Cyclin D1和PCNA陽性細胞比率,流式細胞儀檢測細胞各周期比例和CCK 8法檢測細胞增殖.實驗分4組：mimics組,mi-nc組,inhibitors組和in-nc組.結(jié)果轉(zhuǎn)染后24 h、48 h、72 h,inhibitors組肝細胞Cyclin D1和PCNA mRNA表達水平較in-nc組顯著增多（P〈0.05）,而mimics組肝細胞Cyclin D1和PCNA mRNA表達水平較mi-nc組顯著降低（P〈0.05）.inhibitors組肝細胞Cyclin D1和PCNA陽性細胞比率均高于mi-nc組（P〈0.05）,而mimics組肝細胞Cyclin D1和PCNA陽性細胞比率均低于mi-nc組（P〈0.05）.inhibitorss組肝細胞G0/G1期細胞比例明顯低于in-nc組（P〈0.05）,而mimics組肝細胞G0/G1期細胞比例明顯高于mi-nc組（P〈0.05）.同時,inhibitors組肝細胞S期細胞比例明顯低于mi-nc組（P〈0.05）和in-nc組（P〈0.05）.inhibitors組肝細胞增殖能力明顯高于in-nc組（P〈0.05）,mimics組肝細胞增殖能力明顯低于mi-nc組（P〈0.05）.結(jié)論 miR-199a-3p能夠延長大鼠BRL-3A肝細胞周期和抑制肝細胞增殖,其作用可能與抑制Cyclin D1和PCNA的表達有關(guān).
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