穩(wěn)定表達(dá)犬SLAM受體的Vero細(xì)胞系的建立與應(yīng)用
摘要：信號(hào)淋巴細(xì)胞活化分子是(Signaling lymphocyte activation molecule,SLAM)犬瘟熱病毒(Canine distemper virus,CDV)和麻疹病毒(Measles virus,MV)等麻疹病毒屬病毒的主要細(xì)胞受體,在病毒入侵細(xì)胞的過(guò)程中具有重要作用。為了構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)犬SLAM(d SLAM)受體的Vero細(xì)胞系,本研究將d SLAM基因克隆至真核表達(dá)質(zhì)粒p CAGG-TK-neo中,在d SLAM基因3’端引入Flag標(biāo)簽序列作為分子標(biāo)記,并在其下游引入9 nt的Linker序列、豬捷申病毒(Porcine teschovirus,PTV) 2A基因以及紅色熒光蛋白m Cherry基因,構(gòu)建了重組質(zhì)粒p CAGG-dSLAMFlag-mCherry。用該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Vero細(xì)胞,經(jīng)G418壓力篩選、紅色熒光蛋白表達(dá)及表達(dá)綠色熒光蛋白的重組CDV(r20/8-EGFP)感染鑒定后,篩選到穩(wěn)定表達(dá)d SLAM的細(xì)胞系。CDV野生型分離株JL17感染試驗(yàn)結(jié)果顯示,JL17株在第15代次的Vero-dSLAM細(xì)胞上可良好生長(zhǎng),而在Vero細(xì)胞上不能形成細(xì)胞病變。結(jié)果表明,Vero-dSLAM細(xì)胞可穩(wěn)定表達(dá)d SLAM,為CDV野生型毒株的分離和致病機(jī)制研究奠定了基礎(chǔ)。
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內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)·自然科學(xué)版雜志， 雙月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：研究論文_農(nóng)業(yè)工程、研究論文_基礎(chǔ)科學(xué)、研究論文_計(jì)算機(jī)、研究論文_生態(tài)與環(huán)境科學(xué)、研究論文_林業(yè)科學(xué)、研究論文_農(nóng)業(yè)科學(xué)、綜述、研究論文_動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)、研究論文_林業(yè)工程等等。于1957年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。
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