摘要：谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶(EC2.3.2.13, Transglutaminase, TGase)是一種重要的食品酶。基于N-端酶原區(qū)對(duì)折疊的重要影響,TGase通常以無活性的酶原(pro-TGase)形式在異源宿主中表達(dá)。以茂源鏈霉菌( Streptomyces mobaraensis )pro-TGase為基因來源,重組解脂耶氏酵母( Yarrowia lipolytica po1h)為研究對(duì)象,通過在pro-TGase插入宿主Kex2蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)(策略1)和共表達(dá)pro-TGase與谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶激活金屬蛋白酶(TAMEP,策略2),使pro-TGase在 Y. lipolytica 中表達(dá)后被切除酶原區(qū),而直接轉(zhuǎn)化為活性TGase。搖瓶發(fā)酵結(jié)果顯示,策略1和策略2構(gòu)建得到的重組菌的TGase活力分別為5.26 U/mL和6.77 U/mL。酶學(xué)性質(zhì)研究表明,策略1和策略2得到的重組菌的TGase比酶活、 Km及k cat / Km 均明顯優(yōu)于 S. mobaraensis TGase。基于 Y. lipolytica 食品安全性,研究結(jié)果為TGase的工業(yè)化生產(chǎn)提供了新型高產(chǎn)菌種。