摘要：目的探討重樓皂苷Ⅰ(Polyphylin Ⅰ,PPⅠ)對人黑素瘤A375細(xì)胞凋亡和自噬的影響以及相關(guān)機(jī)制,確定PPⅠ誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬與其促進(jìn)A375細(xì)胞凋亡的相關(guān)性。方法 PPⅠ處理 A375 細(xì)胞后,采用CCK-8法檢測細(xì)胞活力;Annexin V-FITC /PI 雙標(biāo)法檢測PPⅠ對人黑素瘤細(xì)胞凋亡的作用;免疫印跡法檢測相關(guān)蛋白的表達(dá)水平;通過觀察細(xì)胞內(nèi)自噬標(biāo)志分子LC3的分布與表達(dá)來確定PPⅠ對自噬的誘導(dǎo)作用;采用氯喹抑制細(xì)胞自噬后,觀察PPⅠ對細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果 PPⅠ能抑制A375細(xì)胞增殖活力;PPⅠ抑制PI3K/Akt/mTOR通路的活化并促進(jìn)了A375細(xì)胞內(nèi) Bax 和 cleaved-caspase 3的表達(dá),抑制Bcl-2表達(dá),誘導(dǎo)人黑素瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡;PPⅠ促進(jìn)了A375細(xì)胞LC-Ⅱ/LC-Ⅰ值和Beclin-1蛋白表達(dá)的升高,下調(diào)了p62蛋白的水平,促進(jìn)了細(xì)胞自噬;PI3K/Akt/mTOR通路活化劑IGF-1處理A375細(xì)胞后抑制了PPⅠ的上述作用;PPⅠ與自噬抑制劑氯喹聯(lián)用后,A375細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯減弱。結(jié)論 PPⅠ能抑制A375細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡與自噬,抑制自噬減少了PPⅠ誘導(dǎo)的人黑素瘤細(xì)胞凋亡。